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光合细菌处理 8% 高盐有机废水生产辅酶 Q10 等高值产物:性能、菌群与代谢特征 | 彭博士工具屋

混合光合细菌菌群在 8% 盐度有机废水中生物量达 2505.3±50.1 mg/L,COD 与 NH4+-N 去除率分别为 70.1% 与 71.7%;辅酶 Q10 含量达 127.8±22.8 mg/g(6% 盐度最高 226.6±0.07 mg/g),蛋白 411.7±44.2 mg/g、类胡萝卜素 16.5±0.03 mg/g、5-ALA 1.50±0.09 mg/g。高盐下 Ectothiorhodospira 相对丰度升至 71.7%,氮代谢与细胞膜转运通路增强。

光合细菌高盐废水辅酶Q105-ALA菌群结构代谢通路
💡 核心结论:一种混合光合细菌菌群(以 Ectothiorhodospira 与 Rhodovulum 为主)首次在 8% 盐度有机废水中保持优良生长与处理性能(生物量 2505.3 mg/L,COD 与 NH4+-N 去除 70.1% 与 71.7%),并在盐胁迫下显著富集辅酶 Q10(8% 盐度 127.8 mg/g、6% 盐度高达 226.6 mg/g)。
📑 目录

文献信息

英文题名
Treatment of high salinity organic wastewater by photosynthetic bacteria to produce value-added products: Performance, community and metabolic characteristics
作者
Guangming Zhang, Jizheng Zhang, Huize Liu, Shiqi Liu, Longyi Lv, Jinsong Liang
期刊 / 年份
Journal of Water Process Engineering 2024
DOI
10.1016/j.jwpe.2024.105593
卷期 / 页码
64 (2024) 105593
单位
河北工业大学能源与环境工程学院,天津 300130
一句话概括:通过梯度提盐(每 10 天提高 2% 盐度至 10%)培养混合光合细菌,考察 0%–10% 盐度下的生长、污染物去除与高值产物合成,并用 16S 测序与 Tax4Fun/KEGG 预测揭示耐盐菌群结构与代谢机制。

一图不看也要知道的几件事

  • 接种物为市售混合 PSB 菌群(盐城本诺生物),16S 分析显示主要 PSB 为 Ectothiorhodospira sp. 与 Rhodovulum sp.;RCVBN 培养基、自然光、26–30 ℃ 培养 48 h 至对数期。
  • 合成高盐废水含乙酸钠 4.5 g/L、碳酸氢钠 4 g/L、磷酸二氢钾 0.2 g/L、硫酸镁 0.6 g/L、EDTA 0.1 g/L、氯化铵 0.8 g/L、酵母浸粉 0.5 g/L;以 NaCl 20/40/60/80/100 g/L 配成 2%/4%/6%/8%/10% 盐度;初始 COD 3700 mg/L、NH4+-N 215 mg/L。
  • 反应器密闭、工作体积 1.3 L,接种量 15%(v/v),初始 pH 8.5;每 10 天将盐度提高 2% 直至 10%,共运行 60 天。
  • 0%–8% 盐度下 PSB 生物量均>2000 mg/L;最高生物量 2759.7±20.2 mg/L 出现在 4% 盐度;8% 盐度最高生物量 2505.3±50.1 mg/L;10% 盐度最高仅 958.6 mg/L 且后期显著下降。
  • 生物量产率始终>1 mg-biomass/mg-CODRemoved,最高 1.24 出现在 2% 盐度;8% 盐度仍达 1.02。
  • NH4+-N 去除率在 2%–8% 盐度均>70%,2% 盐度最高 85.2±1.63%;8% 盐度为 71.7%;10% 盐度仅 5.33%。
  • COD 去除率与 NH4+-N 趋势一致,2% 盐度最高 84.7±1.98%;8% 盐度显著降至 70.1±1.41%(P<0.05);10% 盐度仅 7.73±1.62%。
  • 辅酶 Q10 含量随盐度先升后降:6% 盐度最高 226.6±0.07 mg/g,8% 盐度为 127.8±22.8 mg/g;2%–8% 盐度较 0% 盐度提高 1.45–2.57 倍;文献中 PSB 的 CoQ10 常见范围仅 13.3–88.8 mg/g。
  • 蛋白含量 2% 盐度最高 501.5±33.7 mg/g,随盐度增加逐渐下降,8% 盐度 411.7±44.2 mg/g(处于无盐废水的 400–600 mg/g 区间内);8% 盐度蛋白浓度 1037.2 mg/L。
  • 类胡萝卜素 2% 盐度最高 35.5±0.25 mg/g(为 0% 盐度的 1.46 倍),8% 盐度显著降至 16.5±0.03 mg/g。
  • 5-ALA 含量在 0%–6% 盐度随盐度持续上升,6% 盐度最高 1.92±0.40 mg/g,8% 盐度 1.50±0.09 mg/g(为 0% 盐度的 2 倍);本研究中 5-ALA 产量为 1.56–4.15 mg/L。
  • 盐度 8% 时群落多样性显著下降:Ace 由 59 降至 28、Chao 由 57 降至 28、Shannon 由 1.7 降至 1.1,Simpson 由 0.30 升至 0.51(Coverage 均为 1)。
  • 门水平 Proteobacteria 在 0% 与 8% 均>85%,8% 时相对丰度增加 12.6%、占群落 98.4%;Firmicutes 降至 1.56%;Bacteroidota 由 4.51% 降至 0.05%,Synergistota 由 1.22% 降至 0。
  • 属水平以 Ectothiorhodospira(41.4%–71.6%)与 Rhodovulum(18.5%–38.1%)为主;8% 盐度下 Ectothiorhodospira 达 71.7%(较 0% 增加 30.2%),Rhodovulum 由 38.1% 降至 18.5%。
  • Tax4Fun/KEGG 功能预测(0% 与 8% 对比):一级通路中代谢占 59.1%–59.6%、环境信息处理 19.9%–21.9%、遗传信息处理 10.3%–11.4%、细胞过程 4.9%–5.2%、人类疾病 2.4%–3.3%、有机系统 0.68%–1.03%。
  • 二级通路中氨基酸代谢在 8% 盐度显著增强,膜转运相对丰度远高于 0%;三级通路中丙酸/丁酸等小分子有机酸代谢上升,类胡萝卜素生物合成与光合作用下降,ABC 转运蛋白显著增加。

研究背景与要解决的问题

石化、制药、电力、染料、制革、食品加工等行业排放的高盐有机废水日益增多。此类废水既富含有机污染物又含大量可溶性无机盐,直接排放会造成严重污染。物理化学法成本高、难以大规模工程应用;活性污泥、膜生物反应器等传统生物法在高盐条件下效率低、操作复杂。

光合细菌具有原始的光能合成系统与多样代谢模式,已被用于废水处理、水产养殖、种植、畜牧与新能源开发。PSB 废水处理作为新兴技术,可在去除有机物的同时合成辅酶 Q10、类胡萝卜素、蛋白与 5-氨基乙酰丙酸(5-ALA),实现废水高效处理与物质资源再生。

已有报道表明 PSB 可耐受一定盐度的有机废水并产生高值物质:3% 盐度下大规模 PSB/PTO-MBR 的 COD 与 NH4+-N 去除率分别为 76.8% 与 84%、生物量达 3.76 g/L;5% 盐度下 COD 与 NH4+-N 去除率为 52.3% 与 66.7%。但更高盐度下 PSB 能否保持优良生长与去除效果未见报道,其耐盐机制亦不明确。

本研究因此考察 0%–10% 盐度有机废水中 PSB 的生长性能、污染物去除、高值产物合成,以及 0% 与 8% 盐度下菌群结构与代谢特征的差异,以揭示耐盐机制。

概念与技术边界

高盐有机废水
同时含高浓度有机污染物与可溶性无机盐(本研究以 NaCl 调节至 2%–10%)的工业废水,盐胁迫会引发微生物细胞内活性氧累积与渗透压失衡。
辅酶 Q10(CoQ10)
脂溶性醌类,可吸收电子清除活性氧、保护细胞免受氧化损伤,同时是电子传递中间体、促进 ATP 合成,是 PSB 的重要高值产物。
5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)
广泛应用于医药与农业的化合物,可由 PSB 合成,其合成与血红素合成的 C5 途径相关,并有助于提高抗氧化酶活性。
Ectothiorhodospira
属 Proteobacteria 的耐盐光合细菌,常见于盐湖、微咸湖与海洋湖泊,可合成并积累甘氨酸甜菜碱等相溶溶质以对抗高盐胁迫。
Rhodovulum
另一种主要 PSB 属,具有完整的外源甜菜碱(ectoine)合成基因簇,但 ectoine 合成需要氧气。
相溶溶质(compatible solute)
细胞在渗透胁迫下积累的小分子有机物,通过维持胞内蛋白与核酸活性提高微生物在高盐环境中的活性。
Tax4Fun / KEGG 预测
基于 16S 序列比对 KEGG 数据库,推断群落潜在功能基因丰度,用以分析盐度对代谢通路的影响。
生物量产率
生物量增量与 COD 去除量之比(mg-biomass/mg-CODRemoved),反映 PSB 将有机物转化为生物质的效率。

体系与方法

环节做法与参数
接种物与预培养混合 PSB 菌群购自盐城本诺生物技术有限公司;16S rRNA 分析显示主要 PSB 为 Ectothiorhodospira sp. 与 Rhodovulum sp.;RCVBN 培养基、自然光、室温 26–30 ℃ 培养 48 h 至对数生长期。
合成废水配制参照 Chen 等改良配方:乙酸钠 4.5 g/L、碳酸氢钠 4 g/L、磷酸二氢钾 0.2 g/L、硫酸镁 0.6 g/L、EDTA 0.1 g/L、氯化铵 0.8 g/L、酵母浸粉 0.5 g/L;分别加入 20、40、60、80、100 g/L NaCl 达到 2%、4%、6%、8%、10% 盐度;各盐度初始 COD 3700 mg/L、NH4+-N 215 mg/L。
反应器运行密闭反应器工作体积 1.3 L,接种量 15%(v/v),初始 pH 8.5,室温自然光;先 0% 盐度培养 10 d,再逐级提盐,每级 2%、培养 10 d,直至 10% 盐度;每 24 h 取样 10 mL 测生长曲线,各盐度于第 0 d 与第 10 d 测 COD 与 NH4+-N。
指标测定发酵液 9000 rpm 离心 10 min 取上清测 COD、NH4+-N(标准方法);盐度用 TDS 水质测定仪;生物量以 OD593 经标准曲线换算(Biomass (mg/L)=555.56×OD593−0.28);蛋白用 Lowry-Folin 法;CoQ10 用 Craven 法于 620 nm 试剂盒测定;5-ALA 与类胡萝卜素用比色法。10% 盐度因生长受抑,仅测 0%–8% 盐度的产物含量。
菌群与代谢分析取 0% 与 8% 发酵液离心沉淀于 −80 ℃ 保存;FastDNA SPIN 试剂盒提取 DNA,338F/806R 扩增 16S rRNA V3–V4 区,Illumina MiSeq PE300 双端测序,Majorbio 云平台按门/属分类并计算 COG 与 KEGG KO 丰度;Tax4Fun 基于 KEGG 预测群落潜在功能。
统计分析三次重复,每指标三次测定,结果以 mean±SD(n=9)表示;单因素方差分析判定显著性(P<0.05)。

主要结果(原文图表逐条解读)

Fig. 1 不同盐度有机废水中 PSB 的生物量(原图第 2 页第 1 张图 fig_002_01.jpeg)
Fig. 1 不同盐度有机废水中 PSB 的生物量(原图第 2 页第 1 张图 fig_002_01.jpeg)
图示信息:折线图,横轴为时间(分段 0–60 d,各盐度对应不同培养窗口),纵轴为生物量(mg/L),曲线代表 0%、2%、4%、6%、8%、10% 六个盐度处理,带误差棒(mean±SD,n=9)。
论文结果:0%–8% 盐度下生物量均>2000 mg/L;4% 盐度生物量最高 2759.7±20.2 mg/L;8% 盐度最高仍达 2505.3±50.1 mg/L;6% 盐度较 4% 略降;10% 盐度生长严重受抑,最高仅 958.6 mg/L 且发酵后期显著下降。生物量产率最高 1.24 mg-biomass/mg-CODRemoved(2% 盐度),8% 盐度仍为 1.02,均>1。
研究意义:8% 盐度未超出该菌群的耐盐阈值,逐步提盐的驯化策略减轻了盐度冲击;4% 为最适生长盐度,10% 则明显超出耐受范围。
Fig. 2 不同盐度下 PSB 对 NH4+-N (a) 与 COD (b) 的去除(原图第 3 页第 2 张图 fig_003_02.jpeg)
Fig. 2 不同盐度下 PSB 对 NH4+-N (a) 与 COD (b) 的去除(原图第 3 页第 2 张图 fig_003_02.jpeg)
图示信息:两幅组合图,横轴为盐度(0、2、4、6、8、10%);左纵轴为出水 NH4+-N(a)/COD(b)浓度(mg/L),右纵轴为对应去除率(%),柱为浓度、折线为去除率,柱上字母表示显著差异(P<0.05)。
论文结果:NH4+-N 去除率在 2%–8% 盐度均>70%,2% 盐度最高 85.2±1.63%,8% 盐度为 71.7%,10% 盐度骤降至 5.33%。COD 去除趋势一致,2% 盐度最高 84.7±1.98%,8% 盐度显著降至 70.1±1.41%(P<0.05),10% 盐度仅 7.73±1.62%。
研究意义:高盐对氮代谢尚有保留(8% 盐度仍>70%),而 10% 盐度已同时击穿生长与代谢功能;8% 盐度较高的 NH4+-N 去除与其可观的蛋白产量相互对应。
Fig. 3 不同盐度下 PSB 中辅酶 Q10 (a)、蛋白 (b)、类胡萝卜素 (c) 与 5-ALA (d) 的含量(原图第 4 页第 3 张图 fig_004_03.jpeg)
Fig. 3 不同盐度下 PSB 中辅酶 Q10 (a)、蛋白 (b)、类胡萝卜素 (c) 与 5-ALA (d) 的含量(原图第 4 页第 3 张图 fig_004_03.jpeg)
图示信息:四幅组合图,横轴为盐度 0、2、4、6、8%,柱为含量(mg/g,左轴)、折线为浓度(mg/L,右轴),字母标注显著差异(P<0.05)(a) CoQ10 (b) 蛋白 (c) 类胡萝卜素 (d) 5-ALA。
论文结果:CoQ10 含量 6% 盐度最高 226.6±0.07 mg/g,8% 盐度降至 127.8±22.8 mg/g,2%–8% 较 0% 高 1.45–2.57 倍。蛋白含量 2% 盐度最高 501.5±33.7 mg/g,随盐度下降至 8% 盐度的 411.7±44.2 mg/g,蛋白浓度在高盐下仍保持约 900–1050 mg/L(8% 盐度 1037.2 mg/L)。类胡萝卜素 2% 盐度最高 35.5±0.25 mg/g(0% 盐度的 1.46 倍),8% 盐度降至 16.5±0.03 mg/g。5-ALA 随盐度上升,6% 盐度最高 1.92±0.40 mg/g,8% 盐度 1.50±0.09 mg/g(为 0% 盐度的 2 倍),产量 1.56–4.15 mg/L。
研究意义:盐胁迫对产物的影响具有选择性:CoQ10 与 5-ALA 被高盐诱导富集,类胡萝卜素与蛋白则被抑制;CoQ10 含量远超文献常见区间(13.3–88.8 mg/g),说明高盐可作为 CoQ10 生产的新途径。
Fig. 4 0% 与 8% 盐度下 PSB 菌群结构变化:(a) 门水平;(b) 属水平(原图第 6 页第 4 张图 fig_006_04.jpeg)
Fig. 4 0% 与 8% 盐度下 PSB 菌群结构变化:(a) 门水平;(b) 属水平(原图第 6 页第 4 张图 fig_006_04.jpeg)
图示信息:两幅堆叠柱状图,比较 0% 与 8% 盐度样品的相对丰度:(a) 门水平(Proteobacteria、Firmicutes、Synergistota、Bacteroidota 等);(b) 属水平(Ectothiorhodospira、Rhodovulum、Klebsiella、Halomonas、Proteiniphilum、Anoxynatronum、Vibrio、Erysipelothrix、Enterococcus、Alkalibacterium、Dethiosulfovibrio、Acetoanaerobium、Marinobacter 等)。
论文结果:门水平 Proteobacteria 在 0% 与 8% 均>85%,8% 时增加 12.6%、占群落 98.4%;Firmicutes 降至 1.56%;Bacteroidota 由 4.51% 降至 0.05%,Synergistota 由 1.22% 降至 0。属水平 Ectothiorhodospira 占 41.4%–71.6%,8% 盐度达 71.7%(较 0% 增加 30.2%);Rhodovulum 占 18.5%–38.1%,8% 盐度由 38.1% 降至 18.5%;Halomonas、Alkalibacterium、Marinobacter 等耐盐属在 8% 盐度上升,Proteiniphilum、Anoxynatronum、Enterococcus 则下降。
研究意义:高盐筛选出以 Proteobacteria 为主导的简单群落,Ectothiorhodospira(合成甘氨酸甜菜碱)取代 Rhodovulum(ectoine 合成需氧,厌氧下受抑)成为核心功能菌属。
Table 1 两个样品的 Alpha 多样性指数(表格类结果,无对应图片)
图示信息:列出 0% 与 8% 盐度样品的 Ace、Chao、Shannon、Simpson、Coverage 与 Sobs 指数。
论文结果:0% 盐度:Ace 59、Chao 57、Shannon 1.7、Simpson 0.30、Coverage 1、Sobs 56;8% 盐度:Ace 28、Chao 28、Shannon 1.1、Simpson 0.51、Coverage 1、Sobs 28。Sobs、Chao、Ace、Shannon 显著下降而 Simpson 升高。
研究意义:盐度升高导致低耐受微生物死亡,群落丰度与多样性下降、优势度集中,Coverage 为 1 表明测序数据可靠。
Fig. 5 PSB 群落功能基因相对丰度的变化(原图第 6 页第 5 张图 fig_006_05.jpeg;原文对比 0% 与 8% 盐度样品)
Fig. 5 PSB 群落功能基因相对丰度的变化(原图第 6 页第 5 张图 fig_006_05.jpeg;原文对比 0% 与 8% 盐度样品)
图示信息:三幅分组柱状图,纵轴为相对丰度(%),(a) KEGG 一级通路、(b) 二级通路、(c) 三级通路;比较 0% 盐度与高盐(8%)样品。
论文结果:一级通路:代谢 59.1%–59.6%、环境信息处理 19.9%–21.9%、遗传信息处理 10.3%–11.4%、细胞过程 4.9%–5.2%、人类疾病 2.4%–3.3%、有机系统 0.68%–1.03%;代谢占比最高,环境信息处理在 8% 盐度上升。二级通路共 11 条,碳水化合物代谢占比最高(8% 盐度 13.8%,0% 盐度 13.6%),氨基酸代谢在 8% 盐度显著增强,膜转运相对丰度远高于 0%。三级通路:丙酸代谢、丁酸代谢等小分子有机酸代谢在 8% 盐度上升;类胡萝卜素生物合成与光合作用下降;甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、精氨酸、脯氨酸代谢显著增加(与 5-ALA 的 C5 合成途径相关);生物膜形成不变,ABC 转运蛋白显著增加。
研究意义:盐胁迫下 PSB 通过增强碳代谢与氨基酸代谢、提高抗氧化与膜转运能力来维持功能,而光合色素合成被抑制,构成其耐盐的代谢基础。

机制小结

  • 氧化胁迫防御:高盐使细胞内活性氧大量累积,CoQ10 作为脂溶性醌可吸收电子清除活性氧、保护 PSB;CoQ10 同时是电子传递中间体,促进 ATP 合成、提高代谢效率与细胞活性,故盐胁迫下 CoQ10 显著富集。
  • 渗透调节:Ectothiorhodospira 通过合成并积累甘氨酸甜菜碱等相溶溶质产生膨压以对抗高盐;甘氨酸甜菜碱还能维持胞内蛋白与核酸活性,是微生物抗盐的最佳相溶溶质。
  • 耐盐菌属竞争:Rhodovulum 具完整 ectoine 合成基因簇,但 ectoine 合成需氧,本研究厌氧条件下其合成受抑,故相对丰度下降,竞争力弱于 Ectothiorhodospira。
  • 膜转运强化:8% 盐度下膜转运通路相对丰度远高于 0%,ABC 转运蛋白显著增加,表明 PSB 增强离子转运以维持渗透压稳态;生物膜形成丰度不变说明细胞膜未被破坏、完整性得以维持。
  • 代谢重编程:8% 盐度下丙酸、丁酸等小分子有机酸代谢增强,这些有机酸在 TCA 循环中转化为乙酰辅酶 A 参与呼吸;碳水化合物代谢(主要关联呼吸)略升。
  • 产物通路权衡:类胡萝卜素生物合成与光合作用下调,与类胡萝卜素含量下降一致;CoQ10 与类胡萝卜素合成途径之间存在竞争关系,可能是 8% 盐度类胡萝卜素显著下降的原因之一。

工程与产业含义

  • 处理窗口:8% 盐度是本研究验证的可行上限(COD 70.1%、NH4+-N 71.7%、生物量 2505.3 mg/L);10% 盐度会导致处理功能崩溃(COD 7.73%、NH4+-N 5.33%),工程上须避免。
  • 驯化策略:以每 10 天提高 2% 盐度逐步提盐的方式可缓解盐度冲击,使菌群在 8% 盐度保持高效代谢,可作为高盐废水启动策略。
  • 产物定向:若以 CoQ10 为目标,宜控制在 6% 盐度(226.6 mg/g);若以 5-ALA 为目标,6% 盐度同样最优(1.92 mg/g);若以蛋白或类胡萝卜素为目标,则应维持低盐(2% 盐度)。
  • 高产率优势:全盐度范围生物量产率均>1 mg-biomass/mg-CODRemoved(8% 盐度 1.02),高于非盐废水常报道的 0.25–0.99,说明该菌群在高盐下有机物向生物质转化效率高。
  • 菌种选择依据:Ectothiorhodospira、Rhodovulum、Halomonas 是处理有机污染物与生产高值物质的主要菌属,可作为高盐体系的功能菌种筛选与保种对象。

适用与不适用场景

✅ 适用场景
  • 2%–8% 盐度的高盐有机废水(含乙酸钠等易降解小分子有机酸与铵盐)领域,如食品加工、制革、染料等行业的含盐有机废水。
  • 以生产辅酶 Q10、5-ALA、蛋白、类胡萝卜素等光合成高值产物为目标的菌体资源化场景。
  • 需要以混合光合细菌菌群(Ectothiorhodospira/Rhodovulum 主导)构建耐盐生物处理系统的研究与中试。
⚠️ 不适用 / 需谨慎
  • 盐度≥10% 的废水:此条件下 PSB 生长严重受抑、COD 与 NH4+-N 去除率分别仅 7.73% 与 5.33%,不适用。
  • 非易降解或含毒性物质的复杂高盐废水:本研究使用合成废水,未验证实际复杂基质。
  • 以光合作用或类胡萝卜素产量为目标的场景:高盐会抑制光合色素合成与光合作用。
  • 需要长期稳定运行数据的工程决策:本研究为批次、逐级提盐的实验室规模试验(每盐度 10 天)。

局限与不确定性

作者未解决 / 需要读者注意的问题
  • 试验采用合成废水而非实际高盐工业废水,未考察共存污染物、毒物与杂菌的影响。
  • 为实验室小试(1.3 L 密闭反应器、自然光),未见放大与连续运行验证,光照与温度不可控因素较多。
  • CoQ10 含量在 8% 盐度为 127.8±22.8 mg/g,标准差较大(约 18%),数据离散度偏高。
  • 功能分析基于 Tax4Fun 对 16S 序列的 KEGG 预测,属推断性结果,未做宏基因组或转录组实测验证。
  • 仅对比 0% 与 8% 两个盐度样本的菌群与功能,缺少中间盐度的群落演替数据。
  • 蛋白质含量数据在不同盐度下缺乏严格的横向可比性说明(含量单位 mg/g 与浓度 mg/L 并存),且未提供氨基酸组成与安全性评价。

数据 · 代码 · 经费 · 利益冲突

原文声明作者无已知竞争性经济利益或个人关系;数据可用性声明为“应要求提供(Data will be made available on request)”。资助来源:国家自然科学基金(52070067)。

来源与链接

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