文献信息
一图不看也要知道的几件事
- 在 3.0 L 生物膜光生物反应器(biofilm photobioreactor, BPBR)内,17 根内部红外照明的浸没有机玻璃管为紫色光合细菌(purple phototrophic bacteria, PPB)提供受光面(0.14 m²,受光面体比 46.7 m²·m⁻³),处理经气浮(DAF)出水再预沉的红肉加工废水。
- 批式运行下 COD 去除最高 66%、TN 与 TP 最高 42%,总面积产率 15–20 g VS·m⁻²·d⁻¹,其中超过 60% 的生物量以生物膜形式附着,可在约 160 g TS·L⁻¹(12%–16% DM,峰值 32.4% DM)下刮取。
- 生物膜的品质与废水解耦:收获生物膜 VS/TS >96%、灰分 >4.0%(废水中 >30%),粗蛋白 644 ± 41 mg·g VS⁻¹;悬浮相则酷似废水本身(VS/TS 仅 52.6%–68.3%,B7–12 期粗蛋白降到 415 ± 87 mg·g VS⁻¹)。
- 附着与悬浮两部分的 PPB 群落相似但丰度不同(生物膜 57% 对悬浮 43%,单样本最高分别为 77% 与 56%);批长从 3 d 缩到 2 d 使优势属从 Rhodopseudomonas 转向 Rhodobacter(r = 0.62 的弱相关)。
- 连续流不适合收膜:连续运行期气体回流造成顶空浮渣,实测收获量比物料平衡推算低 50% 以上(5.6 ± 3.2 对 12.4 ± 5.6 g VS·m⁻²·d⁻¹);改为液体回流的批式运行后问题消除。
- 照明能耗一笔账:在 5.8 W·m⁻² 与 0.9 kg·m⁻³·d⁻¹ 体积产率下,输入约 8.2 MWh·t⁻¹(29.5 GJ·t⁻¹);只计附着生长则升至 13.9 MWh 或 50 GJ·t⁻¹,按 $0.1 kWh⁻¹ 折算仅照明就约 $1400·t⁻¹,作者判定为不可行,SCP 生产必须转向户外自然光。
研究背景:为什么必须讨论“长在哪里”
把废水中的有机物与营养盐升级为单细胞蛋白(single cell protein, SCP)已被提出作为一条资源化替代路线,可用的底物包括乳品、饮料、酿造,以及屠宰场排水等食品加工废液。微藻与紫色光合细菌(PPB)都被用于从这些来源生产生物量,二者都以高碳产率与高营养盐捕获潜力为特征,分解代谢所需能量来自人工或自然光。
但今天绝大多数微藻生物量是在开放高速藻类塘(HRAP)的悬浮培养中生长的。HRAP 的优势是合理的面积产率(6.8 g·m⁻²·d⁻¹ 的现实值到 42 g·m⁻²·d⁻¹ 的理想值)与低廉的单位面积资本(约 $40·m⁻²)。而它的劣势——尤其在以废水为底物时——正是本文的出发点:培养体系不稳定、目标生物周期性丢失,以及生物量被不需要的废水组分污染。这些组分包括惰性颗粒、固体、重金属、外源污染物与病原体,它们倾向于在悬浮生物量中累积。原文的判断很直接:如此一来,几乎不可能把不需要的废水组分从 SCP 产品中分离出去。其它缺点还包括沉淀占地大、需要干燥、运行成本高,而收获与干燥往往主导总成本。
- 收获浓度:生物膜与固定化细胞可在比悬浮培养高达 100 倍的浓度下收获(>100 g·L⁻¹ 对 <1.0 g·L⁻¹),同时降低收获与脱水成本。
- 沉降性:颗粒化的微藻—细菌生物量沉速比悬浮生物量高 2000 倍(0.54×10⁻² 对 12 m·h⁻¹,原文数值)。
- 抗捕食:生物膜(颗粒、附着、固定化)可提供躲避捕食的庇护。
- 代价:按单位面积计,生物膜反应器相对悬浮系统的主要劣势是资本成本;且由于光抑制、遮光与扩散限制(包括来自大气的 CO₂),固定化与生物膜系统可能降低面积产率(文献报道 0.72–7.6 g DW·m⁻²·d⁻¹)。
因此本文用一个带浸没式红外照明表面的封闭光生物反应器处理预沉红肉加工废水,围绕三个问题展开:a) 总生物量中有多少被并入生物膜?b) 生物膜的组成如何,是否适合作为单细胞蛋白产品?c) 它与传统蛋白源相比处于什么位置?
体系与方法
| 阶段 | 混合方式 | 回流量 (L·min⁻¹) | 批长 (d) | VLR (g COD·L⁻¹·d⁻¹) |
|---|---|---|---|---|
| Continuous BI | 气体 | 6.0 | HRT 2 d(连续) | 2.6 |
| Batch 1–3(BII a) | 气体 | 6.0 | 3 | 2.3 |
| Batch 4–6(BII b) | 液体 | 0.6 | 3 | 0.7 |
| Batch 7–9(BII c) | 液体 | 0.6 | 2 | 2.0 |
| Batch 10–12(BII d) | 液体 | 3.0 | 2 | 1.7 |
主要结果(原文 Fig. 2–4 与 Table 2)
| 参数 | 单位 | 相 | B1–3 | B4–6 | B7–12 |
|---|---|---|---|---|---|
| VS | g·L⁻¹ | A | 61 ± 15 | 97 ± 15.6 | 155 ± 29.2 |
| VS | g·L⁻¹ | S | 1.3 ± 1.8 | 0.4 ± 0.4 | 1.0 ± 0.29 |
| TS/VS | %VS of TS | A | 99.8 ± 6.6 | 96 ± 2.8 | 94 ± 1.4 |
| TS/VS | %VS of TS | S | 68.3 ± 8.7 | 52.6 ± 11 | 60.4 ± 12.7 |
| TCOD/VS | mg COD·g VS⁻¹ | A | 1764 ± 60 | 1750 ± 38 | 1770 ± 47 |
| TCOD/VS | mg COD·g VS⁻¹ | S | 1964 ± 895 | 1692 ± 607 | 1468 ± 123 |
| 粗蛋白 | mg·g VS⁻¹ | A | 643 ± 30 | 636 ± 13 | 624 ± 48 |
| 粗蛋白 | mg·g VS⁻¹ | S | 621 ± 197 | 604 ± 97 | 415 ± 87 |
| 氮 | mg N·g VS⁻¹ | A | 103 ± 4.9 | 102 ± 2.1 | 106 ± 3.3 |
| 氮 | mg N·g VS⁻¹ | S | 130 ± 80 | 173 ± 122 | 145 ± 60 |
| 氨基酸 | mg·g VS⁻¹ | A | n.a. | 656 | 605 ± 80 |
| 氨基酸 | mg·g VS⁻¹ | S | n.a. | 175 | 304 ± 378 |
| 磷 | mg P·g VS⁻¹ | A | 13.6 ± 1.1 | 13.3 ± 0.3 | 13.4 ± 0.4 |
| 磷 | mg P·g VS⁻¹ | S | 15.2 ± 9.0 | 23.4 ± 22.5 | 14.2 ± 4.4 |
| 总 BChl | mg·kg VS⁻¹ | A | 28.2 | 22.2 ± 0.8 | 23.9 ± 0.5 |
| 总 BChl | mg·kg VS⁻¹ | S | 10.0 | 13.2 ± 10 | 10.2 ± 1.5 |
| 总类胡萝卜素 | mg·kg VS⁻¹ | A | 12.4 | 9.9 ± 0.4 | 11.4 ± 2.0 |
| 总类胡萝卜素 | mg·kg VS⁻¹ | S | 4.3 | 6.1 ± 4.9 | 5.3 ± 0.5 |
产品一致性是本文最强的结论。 附着生物量在 12%–16% DM 下收获,粗蛋白约 644 ± 41 mg CP·g VS⁻¹,总氨基酸 590 ± 122 mg·g VS⁻¹(n=7)。按最后 6 个批次(BII c、d)的平均面积产率折算,该蛋白含量对应附着蛋白产量 6.9 ± 0.7 g CP·m⁻²·d⁻¹ 或 322 ± 33 g CP·m⁻³·d⁻¹,约相当于所投加 SCOD 的 60%。统计上,各次收获之间附着生物量的 TCOD/VS、VS/TS、CP、N、P、BChl 与类胡萝卜素均无显著差异(p > 0.05),金属组成的主成分同样无差异(p = 0.6)。收获生物量的有机组分超过 96% VS of TS,远高于废水本身的约 70%。相反,悬浮生物量蛋白与氨基酸更少(570 与 277.5 ± 114 mg·g VS⁻¹)、惰性更多(62% VS/TS);虽然悬浮相自身随时间也无显著变化,但附着相与悬浮相之间在 CP、TN、TP、BChl 与类胡萝卜素上全部显著不同(p 均 <0.005),金属含量亦显著不同(p<0.05)。
为什么生物膜路线成立:三条独立证据的会合
- 物理上:惰性组分留在液相。 收获生物膜的有机分数 >96% VS of TS,而进水只有 60%–70%,悬浮相为 52.6%–68.7%(与废水相当)。这意味着矿物固体被保留在悬浮态中,产品组成与废水组成实现了解耦——原文认为这正是把 PPB SCP 技术从小众市场推向整个农业工业的关键支撑。
- 生态上:PPB 被富集在膜里。 生物膜的 PPB 相对丰度 57%,悬浮相 43%;BChl 与类胡萝卜素在生物膜中分别高约 2 倍。生物膜的 BChl >20 mg·g VS⁻¹、总类胡萝卜素 >10 mg·g VS⁻¹(BChl/类胡萝卜素比 2.1),高于文献报道值,而两者都是潜在有价值的免疫营养饲料成分,有可能把产品价值提到基础蛋白价值之上。
- 经济上:省掉整条脱水链。 生物膜以约 16% DM(峰值 32.4%)被收获,而光合系统的收获可占总生产成本的 20%–30%(主要因为生物量稀)。原文认为,收获生物膜时气浮、离心机、各类过滤(真空、深床、错流、表面、压力等)或沉淀池等浓缩设备有可能被省掉(资本与运行双省),因为经过这些步骤后的干物质含量也很少超过 15%;此外不需要絮凝剂,又是一笔节省。
氨基酸谱的现实定位。 生物膜的氨基酸组成与在家禽加工废水上生长的混培养 PPB 谱相当,高于 Chlorella sp.,但低于鱼粉。原文明确判断:PPB 生物量可能适合作为鱼饲料的大宗成分,但不太可能在商业饲料中 100% 替代鱼粉,因为若干氨基酸(如甲硫氨酸与赖氨酸)相对不足。这一点已在尖吻鲈(barramundi)投喂试验中被证实——100% 替代导致体重增长显著低于对照,而 66% 与 33% 替代在 47 d 内无显著差异。作者也强调,在把 PPB(或一般微生物生物量)用作富蛋白饲料成分之前,还必须确定毒素、病原、外源污染物与核酸含量等产品安全因素;而能够长期产出组成一致的富蛋白产品是先决条件,这正是本文所解决的部分。
工程、经济与产业含义
照明的账必须先算。 本研究已经把光输入压到 5.8 W·m⁻²,显著低于其它研究的 18–50 W·m⁻²。但在 0.9 kg·m⁻³·d⁻¹ 的体积产率(约 17 g VS·m⁻²·d⁻¹)下,折算能量输入约 8.2 MWh·t⁻¹(29.5 GJ·t⁻¹)——这其实高于在更高辐照下报道的 22 GJ·t⁻¹。若只计附着生长(约 10 g VS·m⁻²·d⁻¹),能耗升到 13.9 MWh 或 50 GJ·t⁻¹。按较低的电价 $0.1 kWh⁻¹ 计算,仅照明一项就约 $1400·t⁻¹,原文认为这是禁止性的(更不用说灯具的资本成本)。结论非常明确:要做 SCP,PPB 必须在户外靠自然光生长以消除照明成本;而对类胡萝卜素(如番茄红素)或特定聚羟基脂肪酸酯(PHA)这类精细化学品,人工照明仍可能是一个选项。
相对微藻光生物反应器的结构性优势。 原文列出的清单包括:没有产物(O₂)抑制、不需要 CO₂、pH 变化很小或没有、做的是一级处理而非二级/三级处理(因而底物更多)、得到的是 PPB 占优的培养物而非被稀释的藻—菌絮体、捕食更少(无好氧原生动物,目前尚未发现捕食者)、所需光输入更低及其对遮光的影响更小。最后一条尤其有意思——它有可能削弱产率的季节性波动(如冬季光照较少),但需要至少一年的日产量平均值来确认;这一点对光抑制也可能重要,同样需要户外验证。
从产业化视角总结:本文的 BPBR 只实现了中等程度的 COD、N、P 去除,但产出了组成一致的、PPB 占优的生物膜。一致性对作为饲料、饲料添加剂或补充剂的价值评估是决定性的,且必须由投喂试验支撑。其附着面积产率(7.0–10 g VS·m⁻²·d⁻¹,悬浮约 7.4)与微藻系统的数据相当,并处于所报道藻类生物膜系统(1.28–2.6、5.5、4.5–7.6 g DW·m⁻²·d⁻¹)的高端;对应的粗蛋白生产速率最高 6.9 ± 0.7 g·m⁻²·d⁻¹ 或 322 ± 33 g·m⁻³·d⁻¹,可把所投 SCOD 的约 60% 回收为蛋白。光生物反应器构型上,平板或管式系统对附着生长很可能可行(壁面生长此前甚至被当作一种麻烦来报道)。
适用场景
- 红肉、家禽等屠宰与食品加工废水的资源化前置处理:作为穿流式前置单元既产 SCP,又把下游 COD、TN、TP 负荷降低 30%–50%,可用于现有厂改造或腾出扩产余量。
- 对产品一致性要求高的饲料原料生产:附着生物量的 TCOD/VS、VS/TS、CP、N、P、BChl 与类胡萝卜素在各次收获间均无显著差异(p>0.05),有机组分 >96% VS of TS。
- 希望省掉脱水链的场景:生物膜可在 12%–16% DM(峰值 32.4%)下直接刮取,有望免去气浮、离心、过滤或沉淀设备以及絮凝剂。
- 固体含量很高的废水(如猪场):此时附着系统相对悬浮系统的品质优势会被放大。
- 以色素为附加价值的路线:生物膜 BChl >20 mg·g VS⁻¹、总类胡萝卜素 >10 mg·g VS⁻¹(比值 2.1)高于文献值,两者都是潜在的免疫营养饲料成分;对精细化学品(类胡萝卜素、PHA)而言人工照明仍可能成立。
- 需要调控优势菌属的研究场景:把批长/SRT 从 3 d 缩到 2 d 可把群落推向 Rhodobacter sp.。
不适用 / 需谨慎的场景
- 以人工 LED 照明进行大宗 SCP 生产:仅照明成本约 $1400·t⁻¹,原文明确判定不可行。
- 含大量脂肪的废水搭配气体回流混合:会在顶空形成浮渣,虚高 COD 去除速率并显著降低生物量回收率,应改用液体回流。
- 连续流模式下追求高收膜率:生物膜会解体并部分重新溶解,实际回收比物料平衡推算低 50% 以上。
- 以 100% 替代鱼粉为目标的商业饲料配方:甲硫氨酸与赖氨酸等氨基酸相对不足,尖吻鲈试验中 100% 替代已导致体重增长显著下降(66% 与 33% 替代无显著差异)。
- 颗粒态为主、未经预酸化的废水直接进料:水解会成为限速步骤,压低 VFA 可用性与生物量产率。
- 对饲料重金属限值极严格的应用:生物膜中 As、Cr、Cu、Pb、Zn 高于常用水产饲料原料,且锌与铝在生物膜中富集。
- 需要立即定量判断放大经济性的项目:原文自述研究与放大处于萌芽状态,投喂试验与安全性数据有限,且缺乏至少一年的户外日产量平均值。
局限与不确定性
- 照明经济性不成立。 即使把光强压到 5.8 W·m⁻²,按附着生长计的能耗仍达 13.9 MWh·t⁻¹(50 GJ·t⁻¹),仅照明约 $1400·t⁻¹,原文自评为禁止性;作者据此指出 SCP 生产必须转向户外自然光。
- 单反应器、小样本。 无平行反应器重复,批式四个子相各仅 3 个批次,因此“回流量提高 5 倍无影响”等结论的统计力有限。
- 收获与产率测定的系统性偏差。 批式期只随机刮 3 根管再外推,且刮片、手套、管壁与刮刀上的残留导致回收被低估(每管仅 45 mg VS);固含量受收获过程失水差异影响(32.4% DM 的峰值即由数分钟延迟造成的蒸发与滴水所致)。悬浮相 PPB 产率是用 BChl/VS 比间接换算的,非直接称重。
- 连续流模式下生物膜不稳定。 气体回流造成顶空浮渣,虚高 COD 去除速率(BII a 的 1.7 g·L⁻¹·d⁻¹ 主要来自浮渣堆积而非生长,去除 COD 中仅 20% 被回收为生物量),且刮拭后生物膜会重新悬浮而回收不佳。
- 水解限速未被解决。 各批 tend 的 VFA-COD 仅 14–20 mg·L⁻¹,说明颗粒态废水的水解限制了碳的生物可利用性与生物量产率;预发酵方案在本文中只是建议,未做实验。
- 金属数据仅具指示性。 Al、As、Co、Pb、Se、Zn 的置信区间很大;生物膜中 As、Cr、Cu、Pb、Zn 含量高于常用水产饲料原料,锌与铝甚至在生物膜中富集最多 6.5 倍。
- LED 内照造成的温升限制辐照上限。 16 W·m⁻² 时水温达 36 ℃、5.8 W·m⁻² 时 33 ℃,原文明确指出这一温升本身限制了系统可施加的辐照。
- 产品安全尚未评估。 毒素、病原、外源污染物与核酸含量等在应用为富蛋白饲料成分前必须确定的项目,本文均未涉及;红外穿透差(0.1 g·L⁻¹ 时 50% 光被顶部 3–4 cm 吸收)也未在放大尺度上验证。
数据 · 代码 · 经费 · 利益冲突
来源与链接
图片来源:订阅期刊论文,原文 Fig. 1–4 与 Table 1–2 按学术评述引用方式复用,版权归 Elsevier 及作者所有,来源见 DOI: 10.1016/j.watres.2020.115909。