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紫色光养生物膜光生物反应器产共产物:燃料合成废水 vs 简单碳源 | 彭博士工具屋

用四种碳源(燃料合成废水 FSW、乙酸钠、葡萄糖、蔗糖)在生物膜光生物反应器中培养紫色非硫细菌:FSW 悬浮生物量最高(1388.8 mg)、蛋白含量 36.1%–37.7%、PHB 总产量最高(253.16 mg);葡萄糖 PHB 含量最高(悬浮 18.1%、生物膜 12.9%);乙酸蛋白含量最高(41.7%、41.0%);所有碳源色素浓度均偏低。

紫色非硫细菌生物膜光生物反应器燃料合成废水PHB单细胞蛋白色素
💡 核心结论:在生物膜光生物反应器中,燃料合成废水(FSW)比乙酸、葡萄糖、蔗糖更适合 PNSB:其悬浮生物量最高(1388.8 mg)、蛋白产量最高(悬浮 33.4 mg/d)、PHB 总产量最高(253.16 mg),且氮缺乏的 FSW 无需预处理;但 PHB 含量最高的是葡萄糖(悬浮 18.1%、生物膜 12.9%),蛋白含量最高的是乙酸(41.7%、41.0%)。
📑 目录

文献信息

英文题名
Evaluating bioproducts production in a purple phototrophic biofilm photobioreactor: Fuel-synthesis wastewater vs. simple substrates
作者
Sultan Shaikh, Mirna N.A. Abdelnabi, Annette Shoba Vincent, Gordon McKay, Hamish Robert Mackey
期刊 / 年份
Bioresource Technology Reports 2024
DOI
10.1016/j.biteb.2024.101945
卷期 / 页码
27: 101945
单位
哈马德·本·哈利法大学(卡塔尔基金会);卡塔尔卡内基梅隆大学生物科学系;坎特伯雷大学土木与自然资源工程系(新西兰)
一句话概括:以农业遮阳网为载体的四个平行生物膜光生物反应器,横向比较 FSW 与三种纯碳源对 PNSB 生物膜形成、PHB、SCP、色素及群落结构的影响,并用 16S 测序解释糖类底物下酵母富集的现象。

一图不看也要知道的几件事

  • FSW 悬浮生物量最高(VSS 1388.8 ± 0 mg),其次为蔗糖与乙酸(几乎相等),葡萄糖最低(520.8 ± 0 mg);同一底物下悬浮生物量显著高于生物膜(p<0.001)。
  • 生物膜生物量最高出现在蔗糖(758.3 ± 11.7 mg),其次为 FSW、乙酸、葡萄糖。
  • OD420 悬浮生长:FSW 7.28 > 乙酸 5.40 > 蔗糖 2.02 > 葡萄糖 0.54;FSW 与乙酸呈紫色 PNSB 培养,糖类反应器呈白色酵母培养。
  • COD 去除量:FSW 2165 ± 35.3 mg/L 与蔗糖 2160 ± 14.1 mg/L 最高(p=1.0,无差异);COD 去除率约 37.4%。
  • 生物量产率:葡萄糖 1.46 ± 0.38 g-VSS/g-COD(最高但不确定度大,疑有自养生长);乙酸 0.72 ± 0.04、蔗糖 0.66 ± 0.01、FSW 0.55 ± 0.01 g-VSS/g-COD,各组间无显著差异。
  • 群落以 Alphaproteobacteria(60–63%)与 Bacteroidia(8–12%)为主;目水平 Rhizobiales 占比接近 60%(乙酸悬浮样约 50%)。
  • 乙酸蛋白含量最高(悬浮 41.73 ± 0.0%,生物膜 40.97 ± 0.0%);FSW 次之(生物膜 37.73 ± 0.0%、悬浮 36.1 ± 0.0%);葡萄糖 30.1%/25.5%;蔗糖最低 8.5%/7.8%。
  • PHB 含量:葡萄糖悬浮 18.1 ± 0.1%、生物膜 12.9 ± 1.1% 最高;FSW 15.0 ± 0.3%(悬浮)、11.3 ± 0.5%(生物膜)次之;蔗糖最低(悬浮 4.2%、生物膜 3.4%)。
  • PHB 总产量 FSW 最高(253.16 ± 1.4 mg),PHB 产率则以葡萄糖最高(0.237 ± 0.05 mg-PHB/mg-COD)。
  • 色素浓度整体偏低:Crts 悬浮 0.032–0.63 μg/g、生物膜 0.07–3.05 μg/g;BChls 悬浮 0.0092–5.84 μg/g、生物膜 0.026–4.41 μg/g,均低于文献报道值。

研究背景与要解决的问题

循环经济下的废水处理不仅要达标,还要最大化资源回收。紫色非硫细菌(PNSB)因光异养代谢具有接近 1 gCOD/gCOD 的高底物-生物量转化率,可在近红外光下富集于混培体系,并同时产 PHB、类胡萝卜素、细菌叶绿素与单细胞蛋白(SCP)。

PHB 作为可降解生物塑料前景好,但生产成本高于石油基聚合物,其中 PHB 的分离回收可占成本约 30%;传统离心、过滤、沉淀等采收方式能耗高、耗时或占地大。生物膜系统因生物量浓度高,下游几乎无需脱水,且能抵抗抑制性物质与负荷波动,是潜在的低成本方案。

PNSB 可利用多种有机碳源产 PHB,但多数底物需预处理。燃料合成废水(FSW)是费托合成制合成燃料的副产物,富含挥发性脂肪酸(VFAs)与醇类、透明且胶体颗粒少、无需预处理,但传统上以好氧氧化处理,能耗高、CO₂ 排放显著。

文献中缺乏基于生物膜的 PNSB 资源回收研究。本研究设三个目标:(a) 评估不同碳源对 PNSB 生物膜形成与悬浮生长的影响;(b) 比较 FSW 与纯碳源在 PHB 生产上的适配性;(c) 评估悬浮与生物膜生长中 carotenoids、BChls、SCP 等共产物的潜力。

概念与技术边界

PNSB(紫色非硫细菌)
一类光异养细菌,底物转化率高、可在近红外波段光合,能在混培体系中富集,属 Rhizobiales 等类群。
FSW(燃料合成废水)
费托合成制合成燃料的副产物,富含 VFAs 与短链醇,透明、无需预处理,天然氮缺乏。
PHB / PHA
聚羟基丁酸酯/聚羟基脂肪酸酯,可生物降解聚酯;碳过量而氮受限时积累于细胞内。
SCP(单细胞蛋白)
富含蛋白的微生物菌体,可作水产与畜禽饲料蛋白替代品。
生物膜光生物反应器(BPBR)
以农业遮阳网(30.5×15.2 cm,网孔 600–800 μm)为载体的固定生长系统,生物量浓度高,下游脱水需求低。
EPS 与疏水性
胞外聚合物(多糖 EPS-PS、蛋白 EPS-PN)与细胞表面疏水性共同决定生物膜的形成与附着能力。

体系与方法

环节做法与参数
接种物此前在 FSW 上培养的 PNSB 富集混培体系,转接至四种碳源。
碳源与培养基FSW、乙酸钠、D-葡萄糖、蔗糖四种碳源,全部配成 COD 5790 mg/L 以匹配 FSW 可溶性 COD(5790 ± 84.5 mg/L,来自卡塔尔气转液工厂);营养添加 KH2PO4 3.03 g/L、NaHCO3 4.29 g/L、ATCC 微量元素 10 mL/L、ATCC 维生素 10 mL/L;所有处理均不加氮源(氮缺乏以促进生物膜形成)。
反应器与运行四个玻璃瓶反应器(2 L 容积)批次运行 15 天;遮阳网载体;室温、300 rpm 搅拌;瓶表面平均辐照度 100 W/m²,由距瓶 15 cm 的 30 W 白色泛光灯提供;初始 pH 调至 7.5;通氮 90 s 保证厌氧。
分析指标OD420 跟踪悬浮生长;终点测悬浮与生物膜的 TSS/VSS(以 mg 计);COD 用量热消解(USEPA 8000,Hach);EPS 用甲醛-加热法提取,EPS-PS 用苯酚-硫酸法(葡萄糖标准)、EPS-PN 用 Lowry 法;疏水性用百分比表示;Crts 用丙酮提取测 A480,BChls 用丙酮/甲醇(7:2)避光提取;胞内蛋白用改良碱提法 + Lowry;PHB 用次氯酸钠分散法后转巴豆酸测 A235。
群落分析终点采集悬浮与生物膜样品,DNeasy PowerBiofilm 试剂盒提取 DNA;IonS5 平台测 16S rRNA 高变区(引物 16S rRNA For AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG / Rev ACG GCT ACC TTG TTA CGA CTT);QIIME 2(2021.4)+ SILVA 数据库分类。
统计ANOVA 检验,p<0.05 为显著,随后用 Bonferroni 校正做两两比较;使用 Statistix 10。

主要结果(原文图表逐条解读)

Fig. 1 本研究使用的生物膜光生物反应器及实验装置。
Fig. 1 本研究使用的生物膜光生物反应器及实验装置。
图示信息:反应器装置照片拼图:四个玻璃瓶反应器(BPBR 1–4)各配磁力搅拌器与 30 W LED 泛光灯,瓶外加遮阳网;标注四种碳源及 COD(FSW 5790±84.85、乙酸 5770±42.43、葡萄糖 5790±70.71、蔗糖 5790±35.36 mg/L)。
论文结果:四个反应器分别以 FSW、乙酸、葡萄糖、蔗糖为唯一碳源运行,碳源强度统一为约 5790 mg-COD/L。
研究意义:确立"同 COD 强度、不同碳源"的对照设计,使碳源性质(而非浓度)成为唯一变量。
Fig. 2 (a) 终点生物量(VSS 法)(b) 悬浮细胞生长随时间(吸光度)(c) FSW(红框)、乙酸(黑框)、葡萄糖(蓝框)、蔗糖(绿框)的生物膜形成 (d) COD 去除量与去除率。
Fig. 2 (a) 终点生物量(VSS 法)(b) 悬浮细胞生长随时间(吸光度)(c) FSW(红框)、乙酸(黑框)、葡萄糖(蓝框)、蔗糖(绿框)的生物膜形成 (d) COD 去除量与去除率。
图示信息:(a) 分组柱图,纵轴生物量(mg),横轴四种碳源,分悬浮与生物膜两系列;(b) 折线图,纵轴 OD420(0–8),横轴时间(0–15 d);(c) 四张载体照片;(d) 双纵轴柱图(左 COD 去除量 mg/L、右去除率 %)。
论文结果:悬浮生物量 FSW 最高(1388.8 ± 0 mg),蔗糖与乙酸几乎相等,葡萄糖最低(520.8 ± 0 mg);生物膜生物量蔗糖最高(758.3 ± 11.7 mg)。OD420 为 FSW 7.28 > 乙酸 5.40 > 蔗糖 2.02 > 葡萄糖 0.54,与 VSS 不一致,源于吸光度对紫色细菌的偏好;糖类反应器呈白色酵母培养。照片显示 FSW 与乙酸为紫色生物膜,蔗糖载体满覆盖、透光下降,葡萄糖生物膜极少。COD 去除量 FSW 2165 ± 35.3、蔗糖 2160 ± 14.1 mg/L 最高(p=1.0),其次乙酸、最后葡萄糖。
研究意义:FSW 最利于 PNSB 悬浮生长与生物膜形成;葡萄糖对 PNSB 生长最不利;OD 与 VSS 的差异揭示糖类条件下发生酵母替代 PNSB 的群落转变。
Fig. 3 FSW 与乙酸培养下,悬浮与生物膜生长的相对丰度(%总 OTUs):(a) 门水平 (b) 纲水平。
Fig. 3 FSW 与乙酸培养下,悬浮与生物膜生长的相对丰度(%总 OTUs):(a) 门水平 (b) 纲水平。
图示信息:(a) 归一化堆叠柱图,纵轴 0.0–1.0,横轴为 FSW 悬浮/FSW 生物膜/乙酸悬浮/乙酸生物膜,系列为 Actinobacteria、Ignavibacteria、Clostridia、Alphaproteobacteria、Bacteroidia、Gammaproteobacteria 等;(b) 目水平水平堆叠柱图,系列含 Rhizobiales、Bacteroidales、Caulobacterales、Xanthomonadales、Enterobacteriales 等。
论文结果:两种底物、两种生长方式的优势纲均为 Alphaproteobacteria(60–63%)与 Bacteroidia(8–12%);目水平 Rhizobiales 占近 60%(乙酸悬浮样约 50%),Bacteroidales 在各样中占 10–15%;Enterobacterales 在 FSW 生物量中略高(可发酵甲醇、乙醇等醇类);Caulobacterales 与 Xanthomonadales 在乙酸(悬浮与生物膜)及 FSW 生物膜中检出,但在 FSW 悬浮样中缺失;Sphingobacteriales 与 Ignavibacteriales 除 FSW 悬浮外普遍存在。
研究意义:FSW 与乙酸培养由 PNSB(Rhizobiales)主导,与紫色外观一致;FSW 悬浮样群落更单一,提示其中短链醇类等成分可能具有抑制作用,反而有利于 PNSB 富集。
Fig. 4 各 BPBR 中悬浮与生物膜生物量的 (a) EPS-PS (b) EPS-PN (c) 疏水性。
Fig. 4 各 BPBR 中悬浮与生物膜生物量的 (a) EPS-PS (b) EPS-PN (c) 疏水性。
图示信息:三张分组柱图,横轴均为 FSW、乙酸、葡萄糖、蔗糖,分悬浮与生物膜两系列;纵轴分别 EPS-多糖(mg/g)、EPS-蛋白(mg/g)、疏水性(%)。
论文结果:生物膜 EPS-PS 以乙酸最高(125 ± 19 mg/g),其次 FSW(83 ± 0.1)、葡萄糖(81 ± 32)、蔗糖(51 ± 0.9);悬浮 EPS-PS 以葡萄糖最高(981 ± 19 mg/g,p<0.001,约为次高值两倍),FSW 263 ± 0.8、蔗糖 209 ± 5.7、乙酸 98 ± 11 mg/g。生物膜 EPS-PN 以乙酸最高(122 ± 18 mg/g),悬浮 EPS-PN 以 FSW 最高(247 ± 0.4 mg/g),乙酸最低(80.23 ± 8.7 mg/g)。疏水性方面 FSW 生物膜 11.2 ± 1.6% 与悬浮 9.2 ± 1.6% 相当;乙酸生物膜(49.7 ± 4.5%)远高于悬浮(23.4 ± 4.5%);糖类则相反。
研究意义:底物通过光照与传质影响 EPS 分配:乙酸生物膜多糖/蛋白均高,FSW 悬浮蛋白高;糖类的高多糖与低生物量提示能量被导向过量 EPS 生产;疏水性与生物膜形成能力在本研究中并非正相关。
Fig. 5 各 BPBR 中悬浮与生物膜生长的 (a) 蛋白质量 (b) PHB 质量。
Fig. 5 各 BPBR 中悬浮与生物膜生长的 (a) 蛋白质量 (b) PHB 质量。
图示信息:两张分组柱图,横轴 FSW、乙酸、葡萄糖、蔗糖,分悬浮与生物膜两系列;纵轴分别为蛋白质量(mg)与 PHB 质量(mg),含显著性字母与误差棒。
论文结果:蛋白产量(蛋白质质量/实验时间)悬浮以 FSW 最高(33.4 ± 0.07 mg/d),其次乙酸、葡萄糖,蔗糖最低(6.5 ± 0.08 mg/d);生物膜也以 FSW 最高(10 ± 0.0 mg-PN/d)。PHB 质量方面葡萄糖悬浮含量最高(18.1 ± 0.1%)但 FSW 因生物量高而 PHB 总质量最大。
研究意义:产量(productivity)由生物量与细胞内含量共同决定,因此尽管葡萄糖 PHB 含量最高,FSW 的整体产出仍最优;这提示按目标产物选择底物时必须区分"含量"与"总量"。
Table 1 不同碳源培养光合细菌的 Crts 与 BChls 产量及文献对比。(表格未提取为图片,仅文字解读)
图示信息:表格列出本研究的 FSW/乙酸/葡萄糖/蔗糖(混培、白光 LED、氮缺乏)与文献中 RMPW、ASW、ABW 等条件下 Crts 与 BChls 的悬浮与生物膜含量。
论文结果:Crts 悬浮 0.032–0.63 μg/g、生物膜 0.07–3.05 μg/g;其中 FSW 悬浮 0.63 ± 0.03、生物膜 3.05 ± 0.02 μg/g;BChls 悬浮 0.0092–5.84 μg/g、生物膜 0.026–4.41 μg/g,FSW 悬浮 5.84 ± 0.40、生物膜 4.41 ± 0.03 μg/g 均最高;葡萄糖与蔗糖的 BChls 比 Crts 低一个数量级。所有值均低于文献报道(如 ABW 纯培养 BChls 达 9790–10,750 μg/g)。Crts/BChls 比:悬浮 0.09–0.28、生物膜 0.69–8.32。
研究意义:混培与未优化光照(白光而非红外)限制了色素积累;但 FSW 的色素产出仍优于更昂贵的纯碳源(如乙酸),说明低成本废水在色素生产上具相对优势。生物膜 Crts 高而悬浮 BChls 高,与两者所受光强差异一致。
Table 2 不同碳源培养光合细菌的 SCP 与 PHB 含量及文献对比。(表格未提取为图片,仅文字解读)
图示信息:表格列出本研究四种碳源的悬浮与生物膜 SCP(%)与 PHB(%),以及文献中 RMPW、ASW、鸡粪培养基等对照值。
论文结果:SCP:乙酸悬浮 41.7 ± 0.0%、生物膜 41.0 ± 0.1% 最高;FSW 生物膜 37.7 ± 0.0%、悬浮 36.1 ± 0.1%;葡萄糖 30.1%/25.5%;蔗糖 8.5%/7.8%。PHB:FSW 悬浮 15.0 ± 0.3%、生物膜 11.3 ± 0.5%;乙酸 11.5 ± 0.7%/9.2 ± 0.3%;葡萄糖 18.1 ± 0.1%/12.9 ± 1.1%;蔗糖 4.2 ± 0.9%/3.4 ± 0.3%。
研究意义:SCP 含量在乙酸与 FSW 下达到饲料级(40% 左右),糖类因酵母主导而明显偏低;PHB 含量在葡萄糖下最高,但绝对产量受低生物量制约。
Table 3 不同碳源下 PHB 总产量(悬浮+生物膜)与 PHB 产率。(表格未提取为图片,仅文字解读)
图示信息:表格列出四种碳源的 PHB 总质量(mg)与 Y_PHB/S(mg-PHB/mg-COD)。
论文结果:总 PHB:FSW 253.16 ± 1.4 mg 最高,乙酸 149.78 ± 9.2 mg,葡萄糖 104.59 ± 3.5 mg,蔗糖 74.72 ± 7.4 mg;FSW 与其他底物的差异显著(p<0.006)。PHB 产率:葡萄糖 0.237 ± 0.05 mg-PHB/mg-COD 最高(与其他底物差一个数量级,p<0.001),其次乙酸 0.073 ± 0.0、FSW 0.069 ± 0.0、蔗糖 0.020 ± 0.0 mg-PHB/mg-COD;乙酸与 FSW 的产率落在文献报道的 0.027–0.67 mg-PHB/mg-COD 区间中部。
研究意义:从总产量角度 FSW 是 PNSB 产 PHB 的优选底物,得益于其高生物量与混合 VFAs;但若以单位 COD 产率计,葡萄糖最高,其数值受极低生物量带来的高不确定度影响。

机制小结

  • 氮缺乏抑制细胞增殖而促使碳流转向 PHB 储存,同时有利于 PNSB 生物膜形成,因此四种碳源均不加氮源。
  • FSW 富含多种 VFAs 与醇类,作为 PHB 前体可支持多菌种更高效合成,因而总 PHB 产量最高。
  • 糖类(葡萄糖、蔗糖)被酵母大量利用形成白色生物膜,PNSB 相对减少,导致 BChls 低一个数量级、蛋白含量显著下降。
  • 生物膜位于反应器边缘直接受光,光强高,细胞合成更多 Crts 以耗散过剩光能;反应器中心悬浮细胞受遮阳网与生物膜遮挡、光强低,故提高 BChls 以捕获有限光能。
  • 悬浮生物质团块小、整体暴露于较高光强,故 PHB 含量普遍高于受光遮蔽的生物膜内层。

工程与产业含义

  • FSW 无需预处理、天然氮缺乏、富含 VFAs,适合直接接入 PNSB 生物膜反应器进行资源回收,可替代高能耗的好氧氧化处理。
  • 以农业遮阳网作为载体成本低、柔性、可重复使用且透光良好,适合生物膜 PNSB 体系。
  • 按目标产物选底物:追求总产量与生物量选 FSW;追求最高 PHB 含量或产率选葡萄糖(但生物量极低、不确定度大);追求最高蛋白含量选乙酸。
  • 生物膜系统的下游优势体现在高生物量浓度、几乎无需脱水,可降低占成本约 30% 的 PHB 回收环节负担。
  • 若需提高色素产出,应提高 PNSB 主导度并对光源(如改用红外)与光照强度进行优化。

适用与不适用场景

✅ 适用场景
  • 气转液/费托合成工厂产生的 FSW 等富含 VFAs 与醇类、氮缺乏的工业废水。
  • 以 PNSB 混培体系、固定生长(生物膜)方式运行的资源回收型光生物反应器。
  • 需要同时评估 PHB、SCP 与色素多种产物的共产物场景,尤其对底物选择做权衡时。
⚠️ 不适用 / 需谨慎
  • 以糖类(葡萄糖、蔗糖)为主导碳源且氮缺乏的场景:群落被酵母占据,PNSB 产物(BChls、SCP)显著偏低。
  • 以最大色素产量为目标的场景:本研究各底物的 Crts/BChls 均低于文献,混培与白光 LED 不适配高色素产出。
  • 需要提高 PHB 产率的场景:FSW 产率仅 0.069 mg-PHB/mg-COD,低于葡萄糖。
  • 直接外推到连续流或实际工业装置:本研究为 15 天批次、2 L 规模。

局限与不确定性

作者未解决 / 需要读者注意的问题
  • 实验为 2 L 批次、15 天,未做连续流与放大验证。
  • 生物膜厚度仅靠目视定性评估,缺乏定量手段。
  • 糖类条件下生物量极低导致 VSS 与 EPS 测定不确定度大,生物量产率 1.46 g-VSS/g-COD 被作者质疑可能含自养生长。
  • 葡萄糖与蔗糖样品因以酵母为主而缺少非细菌引物,未做群落测序,群落结论仅覆盖 FSW 与乙酸。
  • 色素数据采用混培与白光 LED、非优化条件,绝对值明显低于文献,横向可比性受限。
  • COD 去除率 37.4% 低于作者此前 19 天实验的 72.5%,作者归因于初始 COD 与批次差异,处理效果的可比性存疑。

数据 · 代码 · 经费 · 利益冲突

数据可用性:"Data will be made available on request"(应要求提供)。利益冲突:作者声明无利益冲突。经费:卡塔尔国家研究基金 NPRP11-S-0110-180245 与卡塔尔壳牌研究与技术中心。补充材料见 https://doi.org/10.1016/j.biteb.2024.101945。

来源与链接

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