文献信息
一图不看也要知道的几件事
- 反应器为实验室圆柱柱(高 62.5 cm、内径 8.7 cm、总容积 3.7 L),工作体积 3.6 L,底部磁力搅拌 150 rpm,12/12 h 光暗周期,室温,双条 LED 平均光强约 200 μmol/(m2·s)。
- 合成废水 COD 475.5 ± 10.4 mg/L,配方(g/L):CH3COONa 0.6、NH4Cl 0.31、K2HPO4 0.073、NaHCO3 3、CaCl2 0.005,另加 10 mL/L 微量元素液;接种 10%(v/v) 活性污泥(3.6 L 工作体积),初始 TSS 0.32 g/L。
- 气体总流量 0.2 L/min,气体停留时间(GRT)18 min;液相先批次运行 11 天,之后连续模式,进水/出水/回流泵流量 1、2、1 mL/min,HRT 2.5 天;设 0.9 L 沉淀器。
- 四阶段:I(0–11 天,批次,CO2 2.5%/N2 97.5%,进水 COD 469.3 ± 10.3);II(12–28 天,HRT 2.5 d,0% O2,进水 COD 469.3 ± 10.3);III(29–41 天,不供有机碳,进水 COD 16 ± 2.8);IV(42–57 天,O2 20.4%/CO2 2.5%/N2 76.0%,进水 COD 479.7 ± 10.0)。
- COD 去除:I 期 35.9%(11 天内由 551.5 降至 353.5 mg/L);II 期平均 36.7%、去除速率 68.8 g COD/(m3·d);III 期不供 COD(出水由 223 降至 42.5 mg/L);IV 期最高 91.7%,平均去除速率 175.8 g COD/(m3·d)、比去除速率 311.8 g COD/(kg VSS·d)。
- II 期平均比生长速率 0.10 /d;TSS 由 I 期末 0.5 g/L 增至 II 期末约 0.7 g/L(文中记为 0.7 mg/L,应为 g/L)。系统 SRT 6.4 天。
- 营养去除:I 期 NH4+-N 由 72.3 降至 43.6 mg/L、PO43−-P 由 20.9 降至 11.5 mg/L,COD:N:P 去除比 100:15:5;II 期 NH4+-N 与 PO43−-P 去除率 26.6%、11.9%(比 100:10:2);III 期 NH4+-N 23.7%、PO43−-P 27.1%;IV 期 NH4+-N 仅 10.0%、PO43−-P 29.9%(比 100:1:1)。
- CO2:II 期平均去除率 2.8%(0.11 g/(L·day)),III 期升至 5.4%(0.22 g/(L·day)),IV 期几乎无 CO2 去除;出口 CO2 在每日光/暗循环中出现“光期峰值、暗期谷值”。
- 色素:总叶绿素由 2 mg/g VSS 增至 III 期的 14 mg/g VSS,IV 期回落至 2 mg/g VSS;叶绿素 b 占主导,叶绿素 a、c、d 接近 0,类胡萝卜素含量低。
- 群落:II、III 期 Rhodopseudomonas spp. 相对丰度 92.8%、94.6%(次优势 Thiobaca sp. 2.6%、1.2%);IV 期降至 36.6%,Delftia sp. 与 Microbacterium sp. 升至 18.5%、13.6%;18S 分析显示 II、III 期 Chlorella sorokiniana 为主(84.5%、75.6%),IV 期降至 6.2%。
研究背景与要解决的问题
PNSB 具备光异养、光自养、呼吸、发酵与固氮等多种代谢,能在厌氧条件利用多种碳源与营养物,用于污水处理、气体净化与高值产物生产;但自然环境中 PNSB 常与其他微生物共存,且生长速率较低,难以从混合接种中竞争富集。
PNSB 同化 C、N、P 的 COD:N:P 比约为 100:6.4:1.1;鼓泡柱反应器因传质高、混合均匀、光照与气体供给可调,被认为是高效培养 PNSB 的构型。
已有研究多用已富集的 PNSB 培养物而非混合接种,且富集常需数月(如 SBR 中乙酸合成水需 5 个月批次接种);因此需要从易得的活性污泥快速富集 PNSB 的方法。
PNSB 颗粒有利于收获(沉降性好)并通过提高 SRT、抗逆性与微生物活性改善反应器性能;曝气对造粒过程与代谢路径维持起重要作用,高气速剪切可刺激 EPS 产生,而过高 COD/N 或某些代谢物会诱导解聚。
本研究以宽易得的活性污泥接种,在简易鼓泡柱中以不同 CO2/O2 比例连续供气,考察操作策略对反应器性能、生物量性质与微生物群落的影响。
概念与技术边界
体系与方法
| 环节 | 做法与参数 |
|---|---|
| 合成废水与接种 | 中等强度合成废水 COD 475.5 ± 10.4 mg/L;投加 NaHCO3 3 g/L 维持 pH>7,CaCl2 0.005 g/L 促进颗粒化;微量元素液成分含 EDTA-C10H16N2O8 0.5、FeSO4·7H2O 0.2、ZnSO4·7H2O 0.01、MnCl2·4H2O 0.003、H3BO3 0.03、CoCl2 0.011、CuCl2·2H2O 0.162、NiCl2·6H2O 0.002、NaMoO4·2H2O 0.003、MgSO4·7H2O 0.02(g/L)。接种来自执行硝化-反硝化的污水厂二级活性污泥(墨西哥克雷塔罗)。 |
| 反应器与运行 | 柱式反应器磁力搅拌 150 rpm,12/12 h 光暗(数字控制单元 + Lab-Quest 数据采集卡),光强约 200 μmol/(m2·s)。CO2 与空气或 O2 经质量流量控制器(Model GFC)在混合室混合,经底部石扩散器以 0.2 L/min 进入柱体;实时监测 DO、pH、温度与出口 CO2(每小时采集)。液相先批次 11 天,随后连续运行,HRT 2.5 天。 |
| 阶段设计 | I–III 期通 CO2/N2 维持厌氧,IV 期通 CO2/空气维持好氧;III 期停止供给乙酸形式的有机碳以考察碳源影响。 |
| 分子生物学分析 | 在第 0、28、41、57 天取 50 mL 混合液冷冻保存;PowerSoil DNA 提取;RTL 做 Illumina MiSeq 测序,18S rRNA 引物 EukA7F/EUK555R、16S rRNA 引物 28F/388R;DADA2 v1.26 处理,前/反向读长分别截断至 200 与 250 nt,去嵌合得 ASV 表,Naïve Bayesian 分类,16S 用 SILVA 132、18S 用 PR2 5.0。 |
| 分析测定 | 样品经 0.22 μm 尼龙膜过滤;可溶性 COD 用 USEPA 消解-比色法(Hach 8000)、NH4+ 用水杨酸盐法(Hach 10,031);NO2−、NO3−、PO43− 用离子色谱(ICS 1500);TSS/VSS 按标准方法。叶绿素与类胡萝卜素用 100% 甲醇提取(4 ℃ 暗置 >12 h),在 480、632、652、665、696、750 nm 测吸光度并按文献计算。EPS 用改进加热法分离 LB-EPS 与 TB-EPS(70 ℃ 30 min、10,000g 离心),多糖用比色法、蛋白用 Lowry-Folin 法。 |
主要结果(原文图表逐条解读)
机制小结
- 厌氧 + 光条件下 PNSB 走光异养或光自养,其代谢不依赖 O2,且多数其他微生物需 O2 与有机碳,因此 Rhodopseudomonas spp. 能竞争胜出并成为优势菌(II、III 期相对丰度 >90%)。
- 好氧条件下 PNSB 无法通过光合作用生长,生长速率显著低于厌氧条件,与更耐氧化胁迫的异养菌(Delftia sp.、Microbacterium sp.)竞争处于劣势,生物量与相对丰度同时下降。
- 在有机碳与 CO2 共存时细菌优先利用有机碳;无有机碳时 PNSB 转而以 CO2 为碳源光自养,故 III 期 CO2 去除率提高近一倍。
- 好氧异养呼吸同时消耗有机碳与 O2 并产生 CO2,使 IV 期几乎无 CO2 净去除,出现净产出。
- PNSB 可在厌氧下固氮、将 N2 转化为 NH4+,这可能是本研究中 NH4+ 去除率偏低的原因。
- 磷去除需要厌氧释放与好氧吸收两个过程,II 期仅厌氧故去除有限;IV 期颗粒内部提供厌氧微区,使两过程得以完成,PO43−-P 去除提高。
工程与产业含义
- 若以 CO2 富集气作为无机碳源,建议与空气混合以补充 O2,从而获得较高 COD 去除;厌氧条件(II 期)也可实现约 68.8 g COD/(m3·d) 的去除速率。
- 短时切换到好氧(如 IV 期)可作为 COD 去除的精处理(polishing)策略。
- 为提升 CO2 去除,可在无有机碳的厌氧条件下、于暗期间歇供给 CO2,以避免光期负去除并优化气耗与能耗。
- 快速富集 PNSB:本研究的 II、III 期策略可从活性污泥出发快速建立 PNSB 群落(28 天内优势化),适用于后续高值产物或蛋白生产的上游接种。
- 长期运行建议早期采用较高 HRT 以保证营养与 COD 去除,延长光照可能有助于 PNSB 生长;生物量富集到合适浓度后再逐步降低 HRT 提高负荷。
适用与不适用场景
- 以活性污泥为接种、快速富集 PNSB 的鼓泡柱/柱式光生物反应器启动策略设计
- 需要兼顾 COD 去除与 CO2 吸收、并可按需切换厌氧/好氧的污水与废气联合处理场景
- 判断溶解氧与碳源对 PNSB 群落结构影响的实验与工程决策参考
- 以高氨氮去除为主要目标的场景(本系统 NH4+-N 去除率仅 10%–27%)
- 期望短期形成成熟 PNSB 颗粒的场景(本研究未获得成熟颗粒)
- 高光照效率要求场合:本研究所用光强仅约 200 μmol/(m2·s)
局限与不确定性
- 每个实验条件运行时间较短(各期约 12–17 天),且以建立 PNSB 群落为目的,长期稳定性与不同操作因子(光照条件、CO2 浓度、进水水质)的影响未评估。
- 各阶段代谢路径为基于 CO2 与 COD 代谢记录的推断(Table 3),未直接测定各路径的酶活性。
- 未获得成熟生物颗粒,颗粒化能力结论受限(连续流缺乏沉降时间与选择压力、III 期有机碳不足、缺乏丝状菌)。
- 营养去除(NH4+-N、PO43−-P)显著低于已有高 SRT(11 天)、高生物量(达 4 g VSS/L)的 PNSB 系统。
- 固氮导致 NH4+ 去除偏低的解释为文献推论,本文未做直接实证。
- 文中一处将 II 期末 TSS 写为 0.7 mg/L,与图 2b 约 g/L 量级不符,疑为排版单位笔误。
数据 · 代码 · 经费 · 利益冲突
数据可用性:数据可应诉求提供(Data will be made available on request)。经费:美国国家科学基金会资助 #2105726(观点与结论不代表基金会立场)。利益冲突:作者声明无已知竞争性财务利益或个人关系。致谢:感谢 Gratia Deii Flores Salgado 博士的技术支持。