文献信息
英文题名
Resource recovery through bioremediation of fuel-synthesis wastewater in a biofilm photobioreactor using purple non-sulfur bacteria: A circular bioeconomy approach
作者
Sultan Shaikh, Naim Rashid, Gordon McKay, Hamish Robert Mackey
期刊 / 年份
Chemical Engineering Journal Advances 2024
DOI
10.1016/j.ceja.2024.100614
卷期 / 页码
Vol. 19, 100614
单位
Hamad bin Khalifa University (Qatar Foundation), Doha, Qatar;National University of Sciences and Technology (NUST), Pakistan;University of Canterbury, New Zealand
一句话概括:以 8 个生物膜光生物反应器(BPBR)对比 25/50/75/100% 四种 FSW 浓度与氮充足/缺乏两种条件,同时评估悬浮与生物膜两种生长形态下 PHB、单细胞蛋白、细菌叶绿素、类胡萝卜素与辅酶 Q10 的产量,用生物膜附着生长规避高成本离心收获。
一图不看也要知道的几件事
- 反应器为 2 L 广口玻璃瓶(工作体积 1.7 L),内装 30 cm × 15 cm 农用遮阳网(网孔 600–800 µm)作为生物膜载体,30 W 白光 LED 距瓶壁 15 cm,平均光强 100 W/m²,300 rpm 磁力搅拌,室温光照厌氧批式运行。
- 4 种 FSW 浓度(A=100%、B=75%、C=50%、D=25%)× 2 种氮条件(N−/N+)共 8 个 BPBR;N− 组实验持续 19 天,N+ 组 8 天。
- PHB 细胞含量:悬浮相 N− 为 4.8–17.0%、N+ 为 2.4–11.6%;生物膜相 N− 为 9.7–22.6%、N+ 为 4.5–9.5%;100% 废水条件最高(悬浮 17.0%、生物膜 22.6% DCW)。
- 总 PHB 产量在 100% 废水最高:N− 为 312.6 ± 10.8 mg,N+ 为 331.9 ± 62.5 mg,随废水浓度下降而降低。
- 蛋白含量 N− 为 35–41%,N+ 为 33–44%;氮的存在对蛋白含量有轻微正向作用;PHB 与蛋白含量的 Pearson 相关系数为 −0.55(中度负相关)。
- 生物膜 VBS 最高出现在 BPBR B−(1025.8 ± 19.5 mg),其次 A−、C−、D−;N+ 组最高为 B+(649 ± 6 mg)。
- 悬浮 VSS 受氮影响显著:N+ 组 VSS 是相应 N− 组的 3.2–12 倍;A− 为 685 ± 0 mg,A+ 达 2548 ± 13 mg。
- 生物量产率:A− 为 0.23 g-VS/g-COD,A+ 为 0.50 g-VS/g-COD;按 1.42 的 biomass COD/VSS 比换算,N+ 组为 0.64–0.71 g-COD/g-COD,N− 组为 0.08–0.33 g-COD/g-COD。
- 最高 COD 去除率(>70%)出现在 BPBR D 的两种氮条件下;污染物浓度越高,COD 去除绝对量越高(A>B>C>D,见 Table A3)。
- 辅酶 Q10 最高仅 13.5 µg/g(25% 废水、N−),远低于文献报道的 30,000–45,200 µg/g;Crts 与 BChls 也显著低于纯培养研究(如 276–4889 µg/g)。
- pH 全程维持在 7.8–8.3 区间。
研究背景与要解决的问题
费托(Fischer–Tropsch)合成燃料过程会产生与燃料产量相当的大量废水(fuel-synthesis wastewater, FSW),该废水有机质丰富、酸性强、COD 可高达 32 g/L,是生物法资源回收的理想对象。
紫色非硫细菌(PNSB)代谢多样,可从废水中产出类胡萝卜素(Crts)、细菌叶绿素(BChls)、辅酶 Q10(CoQ10)、单细胞蛋白(SCP)与聚羟基丁酸酯(PHB)等多种产物;PNSB 工艺为厌氧过程,无嗅味也无直接温室气体排放。
光养生物量收获成本很高:离心脱水可占光合生物量总生产成本的约 30%;采用生物膜附着生长可用简单刮取替代离心收获,但 PNSB 生物膜体系研究仍相对空白。
基质强度会显著影响生物产品产量,但不同 FSW 浓度与氮条件组合对 PNSB 多种产物联合回收的影响此前研究不足;作者此前工作已发现氮限制促进生物膜生长。
概念与技术边界
燃料合成废水(FSW)
煤气化/费托合成制液体燃料过程中产生的有机废水,COD 高(可达 32 g/L)、酸性强,富含可被微生物利用的碳源。
PNSB(紫色非硫细菌)
一类可利用光能与有机碳进行光异养代谢的细菌,能在处理废水的同时在胞内积累 PHB、蛋白、色素等产物。
BPBR(生物膜光生物反应器)
在光生物反应器内悬挂多孔载体(如遮阳网)让细菌附着成膜,使生物量集中在载体上,便于低成本刮取收获。
PHB(聚羟基丁酸酯)
PNSB 在氮限制等胁迫下由乙酰辅酶A合成的可降解聚酯,性质类似石化塑料,属胞内碳储存物。
N− / N+
N− 指培养基中不添加氮源(缺氮,促进 PHB 积累与固氮),N+ 指添加 NH4Cl 等氮源(促进生物量与蛋白合成)。
VBS / VSS
VBS 为生物膜挥发性固体量,VSS 为悬浮相挥发性固体量;论文以质量(mg)表示以便悬浮与生物膜直接比较。
体系与方法
| 环节 | 做法与参数 |
|---|---|
| 接种与培养 | 以在 FSW 上驯化 18 个月以上的混合菌群为种子,经光照厌氧富集获得以 Rhodopseudomonas 为主的 PNSB 混合培养;接种后用氮气吹扫去氧并密封。 |
| 培养基配制 | FSW 稀释至目标浓度并添加 NH4Cl 3 g/L、KH2PO4 3 g/L、NaHCO3 4.3 g/L、ATCC 维生素 MD-VS 10 mL/L 与微量元素 MD-TMS 10 mL/L;N− 条件仅省略 NH4Cl。 |
| 反应器运行 | 2 L 玻璃瓶装 1.7 L 工作体积,载体为 30 cm × 15 cm 遮阳网卷成筒状可在瓶内旋转;100 W/m² 白光连续光照,300 rpm,室温,批式运行,N− 19 天、N+ 8 天。 |
| 分析检测 | 悬浮生长以 420 nm 吸光度每日监测;终期测 TSS/VSS 与 TBS/VBS;COD 用 USEPA 8000 高温消解试剂盒测定,TN 用 TOC-L 配套 TNM-L 测定。 |
| 产物提取与定量 | PHB 用次氯酸钠分散法结合紫外分光光度法;蛋白用碱提法 + Lowry 法(牛血清白蛋白为标准);BChls 与 Crts 分别用丙酮/甲醇(7:2 v/v)与丙酮提取;CoQ10 用 Human Coenzyme ELISA 试剂盒于 450 nm 测定。 |
| 统计与重复 | 所有测试做分析重复,并对 A、D 两条件做生物学重复批;结果以均值 ± 标准差表示,采用单因素方差分析(ANOVA,显著性 5%)与 Welch's ANOVA + Bonferroni 事后检验。 |
主要结果(原文图表逐条解读)
图示信息:标注图:A 为 30 W 白光 LED 灯板,B 为 2 L 玻璃瓶,C 为农用遮阳网(附放大图显示其编织网孔结构),D 为 PNSB 混合培养液(呈蓝紫色),E 为磁力搅拌子,F 为磁力搅拌器。
论文结果:反应器由 2 L 玻璃瓶(工作体积 1.7 L)、30 W 白光 LED(距壁 15 cm,平均光强 100 W/m²)、卷成筒状的遮阳网载体与磁力搅拌(300 rpm)构成,密封后于室温光照厌氧运行。
研究意义:该构型把生物量集中在可旋转的廉价织物载体上,为后续“刮取式”收获(替代离心脱水)提供装置基础。
图示信息:两幅 COD(mg/L)–时间(d) 折线图:左图 N− 条件含 A−/B−/C−/D− 四条曲线、时间跨度约 19 天;右图 N+ 条件含 A+/B+/C+/D+ 四条曲线、时间跨度 8 天,均带误差棒。
论文结果:N− 组在约 11 天滞后相后 COD 快速下降直至平稳;N+ 组自实验开始即下降,8 天内趋于平稳。两组中 COD 水平排序均为 A>B>C>D,且最高 COD 去除率(>70%)出现在 D 条件;A、B 在 N− 下 COD 去除高于 N+,但差异不显著(p>0.13),C、D 在两种氮条件下几乎相同(p=1.0)。
研究意义:高浓度废水可去除更多绝对 COD,而低浓度废水去除率更高;缺氮会显著延长启动滞后相,说明氮可获得性决定处理动力学。
图示信息:两幅共享 x 轴(A−,B−,C−,D− ‖ A+,B+,C+,D+)的柱状图:左图纵轴 VSS 与 VBS(mg,黑柱=悬浮、灰柱=生物膜);右图纵轴产率(g-VS/g-COD)。
论文结果:生物膜 VBS 最高为 B−(1025.8 ± 19.5 mg),其次 A−、C−、D−;N+ 下最高为 B+(649 ± 6 mg)。悬浮 VSS 最高出现在 A、最低在 D;N+ 的 VSS 为对应 N− 的 3.2–12 倍(A− 685 ± 0 mg vs A+ 2548 ± 13 mg)。产率 A− 为 0.23 g-VS/g-COD、A+ 为 0.50 g-VS/g-COD,N+ 全部标记为最高显著性组(a),N− 的 D− 最低(约 0.05,标记 c)。
研究意义:高 COD 浓度下缺氮促进生物膜形成,低 COD 浓度下加氮更有利于成膜;氮主要且一致地提升悬浮生长量,A+(悬浮)与 B−(生物膜)分别是两类生长形态的最优条件。
图示信息:上排为四张承载遮阳网上红棕色生物膜的照片(分 N− 与 N+ 两组),下排为 420 nm 吸光度–时间曲线(c 图 0–19 天,d 图 0–8 天)。
论文结果:照片显示生物膜实际附着量与 VBS 测定一致;N− 组起始生长可忽略,第 8 天后才明显,N+ 组则从实验开始即逐步生长并在 8 天内达到最大值。吸光度与 VBS 变化趋势相互印证。
研究意义:直观确认生物膜成膜情况可靠可测;氮显著加快悬浮生长并缩短达到最大生物量的时间。
图示信息:2×2 柱状图组,x 轴为 A−,B−,C−,D− ‖ A+,B+,C+,D+;黑柱=悬浮、灰柱=生物膜(c、d 图仅单色柱);纵轴分别为 PHB(%)、PHB(mg)、总 PHB(mg)、PHB 产率。
论文结果:PHB 细胞含量:悬浮相 N− 为 4.8–17.0%、N+ 为 2.4–11.6%;生物膜相 N− 为 9.7–22.6%、N+ 为 4.5–9.5%;除 A+、B+ 外生物膜含量均高于悬浮相。总 PHB 产量在 100% 废水最高(A− 312.6 ± 10.8 mg、A+ 331.9 ± 62.5 mg),并随废水浓度下降依次降低;各反应器中 A 产率最高、D 最低;总体 N+ 的 PHB 产率高于 N−。A−、B−、A+、B+ 的悬浮与生物膜 PHB 质量差异显著(p<0.017),而 C、D 两种生长形态间无显著差异(p=1.0)。
研究意义:PHB 与废水浓度正相关(高碳负荷利于碳储存),缺氮在悬浮相促进 PHB 合成;随废水稀释,基质受限进入内源衰减阶段会消耗已储存的 PHB,导致产率下降。
图示信息:三幅共享 x 轴(A−…D+)的柱状图,黑柱=悬浮、灰柱=生物膜;纵轴分别为蛋白含量(%)、BChls(µg/g)、Crts(µg/g)。
论文结果:蛋白含量 N− 为 35–41%、N+ 为 33–44%,各稀释条件中 C 最高、A 最低,悬浮与生物膜间无清晰趋势;PHB 与蛋白含量呈 Pearson −0.55 的中度负相关。BChls 在悬浮相普遍高于生物膜(A+、D− 除外);N− 下 BChls 随废水浓度无趋势,N+ 下随废水浓度降低在悬浮相升高、在生物膜中下降。Crts 在悬浮与生物膜间差异不大,整体无明确趋势,且显著低于纯培养研究报道值。
研究意义:蛋白含量对废水浓度与氮条件不敏感,是相对稳健的回收目标;色素产率受光强与菌群组成影响更大,混合菌群中富集度不足限制其回收。
图示信息:柱状图,x 轴为 A−…D+(黑柱=悬浮、灰柱=生物膜),纵轴 CoQ10 含量(µg/g)。
论文结果:除 A+ 生物膜外,CoQ10 含量随废水浓度降低而升高;最高值出现在 25% 废水 + N− 条件(D−),本章报道的最大值为 13.5 µg/g;生物膜与悬浮生长模式之间无显著差异。
研究意义:CoQ10 与 Crts 含量呈反向关系(合成通路存在竞争),FSW 作为基质产 CoQ10 可行性低——文献报道光合细菌可达 30,000–45,200 µg/g,本研究低出两三个数量级。
机制小结
- 氮胁迫(N−)使碳通量从生物量与蛋白合成转向 PHB 储存,同时激活固氮酶带来生态优势,但需付出更高能量代价,导致生物量产率降低(N− 为 0.08–0.33 g-COD/g-COD,N+ 为 0.64–0.71 g-COD/g-COD)。
- PHB 与蛋白合成竞争同一底物碳源:缺氮利于 PHB,营养充足利于 SCP,二者细胞含量呈中度负相关(−0.55)。
- 类胡萝卜素与细菌叶绿素主要受光强与光质调控,而非碳/氮可获得性;Crts 与 CoQ10 共享代谢前体,存在合成竞争,Crts 积累高时 CoQ10 积累低。
- N− 条件下即使不外加氮源仍保持可观蛋白含量,说明体系可依赖液内氮气与取样引入的氮进行固氮,缺氮主要降低生长速率而非显著改变细胞组成。
工程与产业含义
- 生物膜附着生长把生物量集中在可刮取的廉价载体上,可规避离心脱水(可占光合生物量生产成本约 30%)的能耗与成本,对 PNSB 资源回收路线的经济性具有直接意义。
- 若以 PHB 为目标是应选择 100% 原废水 + 缺氮;若以单细胞蛋白为目标则维持平衡 C/N 与充足氮源,同时控制光照以利于生长而非色素积累。
- 色素与 CoQ10 在混合菌群中产率过低,研究认为应改用高纯度富集培养或替代基质,FSW 不宜作为其回收原料。
- PNSB 对高浓度酸性有机废水(COD 可达 32 g/L)具备直接处理能力,且氮限制工艺可利用固氮能力减少氮源投加。
适用与不适用场景
✅ 适用场景
- 高浓度有机工业废水(如煤/气制油费托合成废水)的处理与资源化耦合
- 以 PHB 或单细胞蛋白为主要目标产物的 PNSB 混合菌群工艺设计
- 需要低成本生物量收获方式(附着生长/载体成膜)的光养工艺
⚠️ 不适用 / 需谨慎
- 以类胡萝卜素、细菌叶绿素或辅酶 Q10 为目标产物的废水回收(本研究混合菌群产率过低)
- 要求短启动时间的高通量处理(缺氮条件存在约 11 天的滞后相)
- 需要高纯度单一菌株产物的场景(本研究为混合菌群)
局限与不确定性
作者未解决 / 需要读者注意的问题
- 研究为实验室批式小试(1.7 L),未做连续流与放大验证。
- 部分指标重复实验与首轮结果存在差异(如 PHB 含量 p<0.05、A+ 重复性偏差大),文中归因于 pH 曲线差异与菌群组成/代谢变化。
- A+ 产率的标准差标注为 ±0.7,与均值 0.50 的量级不匹配,数据呈现存在疑点。
- 氮限制组实验时长(19 天)显著长于加氮组(8 天),两条件在时间维度上不完全可比。
- 色素与 CoQ10 的定量比较依赖文献参照值,未经同一方法复测。
数据 · 代码 · 经费 · 利益冲突
经费由卡塔尔国家研究基金 NPRP11-S-0110-180,245 资助,开放获取费用由 Qatar National Library 提供;作者声明无利益冲突;数据可用性声明为“作者无权限共享数据”。
来源与链接
- 原文(Chemical Engineering Journal Advances, 2024, 19:100614) — https://doi.org/10.1016/j.ceja.2024.100614